古人有云：學(xué)知不足，業(yè)精于勤。好的技術(shù)自有不朽的能力?？蒲兄肥侨俗叱鰜淼?，怎么走好這條路?學(xué)習(xí)是關(guān)鍵，在學(xué)習(xí)的道路上，只有歷經(jīng)過風(fēng)雨和磨難的人，方能走向人生的。今天特整理一些相關(guān)ELISA技術(shù)教學(xué)文章，下面就讓我們了解如何有效的學(xué)習(xí)ELISA實驗技。
一，ELISA試劑盒在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍可概括四個方面：
1、免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
二，ELISA試劑盒的基本原理有三條：
（1）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性；
（2）抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
（3）酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。
由于ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上，因而，具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物，它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生放大作用，正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA法是一種既敏感又特異的方法。

四，ELISA試劑盒存在的問題
從以上的簡單介紹中可以看出，ELISA法由于本身所具備的*性，是一項很有發(fā)展前途的實驗性與血清學(xué)診斷方法，而且應(yīng)用的領(lǐng)域也越來越廣泛。但是我們認為ELISA不是萬應(yīng)良方，用它來代替一切，這是不當?shù)摹Ｒ驗镋LISA法還有局限性：
1、由于ELISA所用的抗原大部分還是混合的可溶性抗原，所以對同一微生物寄生蟲或其他物質(zhì)不同部位的抗原還沒有分開。
2、內(nèi)源性過氧化酶的普遍存在，如人腦組織中，呼吸道分泌物的炎癥細胞中及某些病毒的組織培養(yǎng)中均有內(nèi)源性過氧化物酶的活力，常不易除去，如果用某些方法除去時，則病毒的抗原性亦受到破壞，對于用ELISA檢測不利。
3、對ELISA法的非特異性評價的資料尚不夠完善，因此，對出現(xiàn)一些非特異性反應(yīng)的時候，往往不易解釋。
4、固相載體的質(zhì)量常不統(tǒng)一，主要是原料及制備工藝還不一致，致使不同批號的固相載體有時本底值較高，有時吸附性能很差，影響試驗結(jié)果。
5、試劑不統(tǒng)一，現(xiàn)在處于“八仙過海，各顯神通”，標準還不能統(tǒng)一。

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